Tapadh leibh airson tadhal air Nature.com. Tha taic CSS cuibhrichte aig an dreach den bhrobhsair a tha thu a’ cleachdadh. Airson na toraidhean as fheàrr, tha sinn a’ moladh dreach nas ùire den bhrobhsair agad a chleachdadh (no modh co-chòrdalachd a chuir dheth ann an Internet Explorer). Aig an aon àm, gus dèanamh cinnteach à taic leantainneach, tha sinn a’ sealltainn an làraich gun stoidhle no JavaScript.
Tha truailleadh cadmium (Cd) a’ bagairt sàbhailteachd àiteach a’ phlannt-leighis Panax notoginseng ann an Yunnan. Fo chuideam Cd exogenous, chaidh deuchainnean achaidh a dhèanamh gus tuigse fhaighinn air buaidh cur aoil (0, 750, 2250 agus 3750 kg/h/m2) agus frasadh duilleach le searbhag oxalic (0, 0.1 agus 0.2 mol/L) air cruinneachadh Cd agus antioxidants. Co-phàirtean siostamach agus cungaidh-leigheis Panax notoginseng. Sheall na toraidhean, fo chuideam Cd, gum faodadh aol agus frasadh duilleach le searbhag oxalic susbaint Ca2+ ann am Panax notoginseng a mheudachadh agus puinnseanta Cd2+ a lughdachadh. Mheudaich cur aoil agus searbhag oxalic gnìomhachd einnseanan antioxidant agus dh’ atharraich e metabolism riaghladairean osmotic. Is e an rud as cudromaiche an àrdachadh ann an gnìomhachd CAT 2.77 uair. Fo bhuaidh searbhag oxalic, mheudaich gnìomhachd SOD gu 1.78 uair. Lùghdaich susbaint MDA 58.38%. Tha ceangal glè chudromach ann le siùcar so-sgaoilte, amino-aigéid shaora, proline agus pròtain so-sgaoilte. Faodaidh aol agus searbhag oxalic susbaint ian calcium (Ca2+) Panax notoginseng a mheudachadh, susbaint Cd a lughdachadh, strì an aghaidh cuideam Panax notoginseng a leasachadh, agus cinneasachadh saponins agus flavonoids iomlan a mheudachadh. Is e susbaint Cd an ìre as ìsle, 68.57% nas ìsle na an smachd, agus tha e a’ freagairt ris an luach àbhaisteach (Cd≤0.5 mg kg-1, GB/T 19086-2008). B’ e 7.73% an co-roinn de SPN, a’ ruighinn an ìre as àirde am measg nan leigheasan uile, agus mheudaich susbaint flavonoid gu mòr 21.74%, a’ ruighinn luachan meidigeach àbhaisteach agus toradh as fheàrr.
Tha cadmium (Cd) na thruailleadh cumanta ann an ùirean àitichte, bidh e a’ gluasad gu furasta agus tha puinnseanta bith-eòlasach mòr aige. Dh’innis El-Shafei et al2 gu bheil puinnseanta cadmium a’ toirt buaidh air càileachd agus cinneasachd nan lusan a thathas a’ cleachdadh. Tha ìrean cus de chadmium ann an ùir àitichte ann an iar-dheas Shìona air a bhith dona anns na bliadhnachan mu dheireadh. Is e Roinn Yunnan rìoghachd bith-iomadachd Shìona, le gnèithean lusan cungaidh-leigheis anns a’ chiad àite san dùthaich. Ach, tha Roinn Yunnan beairteach ann an goireasan mèinnearach, agus tha am pròiseas mèinnearachd gu cinnteach a’ leantainn gu truailleadh meatailtean troma san ùir, a bheir buaidh air cinneasachadh lusan cungaidh-leigheis ionadail.
'S e lus-leighis maireannach luachmhor a th' ann am Panax notoginseng (Burkill) Chen3) a bhuineas don ghnè Panax den teaghlach Araliaceae. Bidh Panax notoginseng a' leasachadh cuairteachadh fala, a' cur às do shàthadh fala agus a' lughdachadh pian. 'S e Roinn Wenshan, Roinn Yunnan5 am prìomh raon cinneasachaidh. Tha còrr is 75% den ùir ann an sgìrean fàs ginseng Panax notoginseng ionadail air a thruailleadh le cadmium, le ìrean ag atharrachadh bho 81% gu còrr is 100% ann an diofar sgìrean6. Bidh buaidh puinnseanta Cd cuideachd a' lughdachadh gu mòr cinneasachadh phàirtean cungaidh-leighis Panax notoginseng, gu sònraichte saponins agus flavonoids. Tha saponins nan seòrsa de cho-thàth glycosidic aig a bheil aglycones nan triterpenoids no spirostanes. Is iadsan na prìomh ghrìtheidean gnìomhach ann am mòran leigheasan traidiseanta Sìneach agus tha saponins annta. Tha gnìomhachd antibacterial no gnìomhachd bith-eòlasach luachmhor aig cuid de saponins cuideachd leithid buaidhean antipyretic, sedative agus anticancer7. Mar as trice, bidh flavonoids a’ toirt iomradh air sreath de choimeasgaidhean anns a bheil dà fhàinne beinséin le buidhnean feanòlach haidreocsaile ceangailte tro thrì dadaman gualain meadhanach. Is e 2-phenylchromanone 8 am prìomh chridhe. Tha e na antioxidant làidir as urrainn radicals saor ocsaidean a thoirt air falbh gu h-èifeachdach ann an lusan. Faodaidh e cuideachd casg a chuir air dol a-steach einnseanan bith-eòlasach sèididh, slànachadh lotan agus faochadh pian adhartachadh, agus ìrean cholesterol a lughdachadh. Tha e mar aon de na prìomh ghrìtheidean gnìomhach ann am Panax notoginseng. Tha feum èiginneach air dèiligeadh ri duilgheadas truailleadh cadmium ann an ùirean ann an raointean cinneasachaidh Panax ginseng agus dèanamh cinnteach à cinneasachadh a ghrìtheidean cungaidh-leigheis riatanach.
’S e aol aon de na stuthan-dìona a thathas a’ cleachdadh gu farsaing airson glanadh ùir stèidhichte bho thruailleadh cadmium10. Bidh e a’ toirt buaidh air adsorption agus tasgadh Cd san ùir le bhith a’ lughdachadh bith-ruigsinneachd Cd san ùir le bhith ag àrdachadh luach pH agus ag atharrachadh comas iomlaid cation na h-ùire (CEC), sùghaidh salainn na h-ùire (BS) agus comas redox na h-ùire (Eh)3, 11. A bharrachd air an sin, , bidh aol a’ toirt seachad tòrr Ca2+, a’ cruthachadh antagonism ianach le Cd2+, a’ farpais airson làraich adsorption ann am freumhaichean, a’ cur casg air còmhdhail Cd a-steach don ùir, agus tha puinnseanta bith-eòlasach ìosal aige. Nuair a chaidh 50 mmol L-1 Ca a chur ris fo chuideam Cd, chaidh casg a chuir air còmhdhail Cd ann an duilleagan sesame agus chaidh cruinneachadh Cd a lùghdachadh 80%. Chaidh grunn sgrùdaidhean coltach ris aithris ann an rus (Oryza sativa L.) agus bàrr eile12,13.
’S e dòigh ùr a th’ ann an spraeadh duilleach bhàrr gus smachd a chumail air cruinneachadh mheatailtean troma anns na bliadhnachan mu dheireadh airson smachd a chumail air meatailtean troma. Tha a phrionnsapal co-cheangailte sa mhòr-chuid ris an ath-bhualadh chelation ann an ceallan planntrais, a tha ag adhbhrachadh tasgadh mheatailtean troma air balla na cealla agus a’ cur bacadh air gabhail meatailtean troma le lusan14,15. Mar àidseant chelating dà-aigéad seasmhach, faodaidh searbhag oxalic ianan meatailt troma a chealachadh gu dìreach ann an lusan, agus mar sin a’ lughdachadh puinnseanta. Tha rannsachadh air sealltainn gun urrainn dha searbhag oxalic ann am pònairean soighe Cd2+ a chealachadh agus criostalan anns a bheil Cd a leigeil ma sgaoil tro na ceallan trichome àrda, a’ lughdachadh ìrean Cd2+ anns a’ bhodhaig16. Faodaidh searbhag oxalic pH na h-ùire a riaghladh, gnìomhachd superoxide dismutase (SOD), peroxidase (POD) agus catalase (CAT) a mheudachadh, agus treàdh siùcar soluble, pròtain soluble, amino-aigéid shaor agus proline a riaghladh. Riaghladairean metabolach17,18. Bidh searbhag agus cus Ca2+ anns a’ phlannt a’ cruthachadh deascadh calcium oxalate fo ghnìomhachd phròtainean niùclasach. Faodaidh riaghladh dùmhlachd Ca2+ ann an lusan riaghladh èifeachdach a dhèanamh air searbhag oxalic sgaoilte agus Ca2+ ann an lusan agus casg a chuir air cus cruinneachadh searbhag oxalic agus Ca2+19,20.
’S e meud an aoil a thathar a’ cur an sàs aon de na prìomh nithean a bheir buaidh air a’ bhuaidh càraidh. Chaidh a lorg gun robh an dòs aoil eadar 750 agus 6000 kg/m2. Airson ùir searbhagach le pH de 5.0~5.5, tha buaidh aoil a chur an sàs aig dòs de 3000~6000 kg/h/m2 gu math nas àirde na aig dòs de 750 kg/h/m221. Ach, bidh cus aoil a’ leantainn gu cuid de bhuaidhean àicheil air an ùir, leithid atharrachaidhean mòra ann am pH na h-ùire agus dlùthadh na h-ùire22. Mar sin, mhìnich sinn na h-ìrean làimhseachaidh CaO mar 0, 750, 2250 agus 3750 kg hm-2. Nuair a chaidh searbhag oxalic a chur an sàs ann an Arabidopsis thaliana, chaidh a lorg gun deach Ca2+ a lùghdachadh gu mòr aig dùmhlachd de 10 mmol L-1, agus fhreagair teaghlach gine CRT, a bheir buaidh air comharran Ca2+, gu làidir20. Leig cruinneachadh cuid de sgrùdaidhean a rinneadh roimhe leinn dùmhlachd na deuchainn seo a dhearbhadh agus tuilleadh sgrùdaidh a dhèanamh air buaidh eadar-obrachadh stuthan cur-ris exogenous air Ca2+ agus Cd2+23,24,25. Mar sin, tha an sgrùdadh seo ag amas air sgrùdadh a dhèanamh air an dòigh riaghlaidh a bhios aol exogenous agus spraeadh duille searbhag oxalic a’ cleachdadh air susbaint Cd agus fulangas cuideam Panax notoginseng ann an ùir air a thruailleadh le Cd agus tuilleadh sgrùdaidh a dhèanamh air dòighean gus dèanamh cinnteach nas fheàrr à càileachd agus èifeachdas cungaidh-leigheis. Riochdachadh Panax notoginseng. Tha e a’ toirt seachad stiùireadh luachmhor air mar a thathar a’ meudachadh sgèile àiteach lusan luibheach ann an ùirean air an truailleadh le cadmium agus a’ coileanadh an cinneasachaidh àrd-inbhe, seasmhach a tha a dhìth air margaidh nan cungaidhean-leigheis.
A’ cleachdadh an seòrsa ginseng ionadail Wenshan Panax notoginseng mar an stuth, chaidh deuchainn achaidh a dhèanamh ann an Lannizhai, Siorrachd Qiubei, Roinn Wenshan, Roinn Yunnan (24°11′N, 104°3′E, àirde 1446 m). Is e 17°C an teòthachd bhliadhnail chuibheasach agus is e 1250 mm an sileadh bliadhnail chuibheasach. B’ e luachan cùl-fhiosrachaidh na h-ùire a chaidh a sgrùdadh TN 0.57 g kg-1, TP 1.64 g kg-1, TC 16.31 g kg-1, OM 31.86 g kg-1, N air a hydrolyzed alcalin 88.82 mg kg-1, saor bho fosfar 18.55 mg kg-1, potasium saor 100.37 mg kg-1, cadmium iomlan 0.3 mg kg-1, pH 5.4.
Air 10 Dùbhlachd 2017, chaidh 6 mg/kg Cd2+ (CdCl2·2.5H2O) agus làimhseachadh aoil (0, 750, 2250 agus 3750 kg/h/m2) a mheasgachadh agus a chur air uachdar na h-ùire ann an sreath de 0~10 cm de gach plota. . Chaidh gach làimhseachadh ath-aithris 3 tursan. Tha plotaichean deuchainn air an suidheachadh air thuaiream, gach plota a’ còmhdach farsaingeachd de 3 m2. Chaidh sìol-chraobhan Panax notoginseng aon-bhliadhna a dh'aois a thar-phlandadh an dèidh 15 latha de threabhadh. Nuair a thathar a’ cleachdadh lìon sgàile-grèine, tha dian solais Panax notoginseng taobh a-staigh an lìon sgàile-grèine mu 18% de dian solais nàdarra àbhaisteach. Tha an àiteach air a dhèanamh a rèir dhòighean àiteach traidiseanta ionadail. Mus tig ìre aibidh Panax notoginseng ann an 2019, spraeadh searbhag oxalic ann an cruth sodium oxalate. Bha dùmhlachdan searbhag oxalach aig 0, 0.1 agus 0.2 mol L-1, fa leth, agus chaidh NaOH a chleachdadh gus am pH atharrachadh gu 5.16 gus pH cuibheasach fuasgladh an sgudail a shamhlachadh. Sprae uachdar is ìosal nan duilleagan aon uair san t-seachdain aig 8:00m. Às dèidh spraeadh 4 tursan san 5mh seachdain, chaidh lusan Panax notoginseng 3-bliadhna a dh'aois a bhuain.
Anns an t-Samhain 2019, chaidh planntaichean Panax notoginseng trì bliadhna a dh'aois a chruinneachadh bhon raon agus an spùtadh le searbhag oxalic. Chaidh cuid de shamhlaichean de planntaichean Panax notoginseng trì bliadhna a dh'aois a dh'fheumadh a bhith air an tomhas airson metabolism fiseòlasach agus gnìomhachd enzyme a chur ann an tiùban airson reothadh, air an reothadh gu sgiobalta le naitridean leaghaidh agus an uairsin air an gluasad gu frids aig -80°C. Chaidh cuid de shamhlaichean freumha a bha ri thomhas airson Cd agus susbaint tàthchuid gnìomhach aig ìre aibidh a nighe le uisge tap, air an tiormachadh aig 105°C airson 30 mionaid, aig cuideam seasmhach aig 75°C, agus air am bleith ann am mortar airson an stòradh.
Tomhasaich 0.2g de shampall planntrais thioram, cuir e ann am flasg Erlenmeyer, cuir 8ml HNO3 agus 2ml HClO4 ris agus còmhdaich thar oidhche. An ath latha, cleachd tunail lùbte air a chuir ann am flasg Erlenmeyer airson cnàmhadh electrothermal gus an nochd ceò geal agus na sùgh cnàmhaidh a’ ruith soilleir. Às deidh fuarachadh gu teòthachd an t-seòmair, chaidh am measgachadh a ghluasad gu flasg tomhais-lìonaidh 10ml. Chaidh susbaint Cd a dhearbhadh le bhith a’ cleachdadh speactrometer gabhail atamach (Thermo ICE™ 3300 AAS, USA). (GB/T 23739-2009).
Tomhasaich 0.2g de shampall planntrais thioram, cuir e ann am botal plastaig 50ml, cuir 1 mol L-1 HCL ann an 10ml, cuir an caip air agus crathadh gu math airson 15 uairean a thìde agus sìolaich. A’ cleachdadh pìobaid, dèan pìobaid den mheud a tha a dhìth de shìoltachan, caolaich e a rèir sin agus cuir fuasgladh SrCl2 ris gus an dùmhlachd Sr2+ a thoirt gu 1g L-1. Chaidh susbaint Ca a thomhas a’ cleachdadh speactrometer gabhail atamach (Thermo ICE™ 3300 AAS, USA).
Cleachd an inneal tomhais co-fhreagarrach airson modh pasgan fiosrachaidh Malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD), peroxidase (POD) agus catalase (CAT) (DNM-9602, Beijing Prong New Technology Co., Ltd., clàradh toraidh). Àir.: Beijing Pharmacopoeia (cruinn) 2013 Àir. 2400147).
Tomhasaich mu 0.05g de shampall Panax notoginseng agus cuir reagent anthrone-sulfuric acid ri taobhan an tiùba. Crith an tiùb airson 2-3 diogan gus an leaghan a mheasgachadh gu mionaideach. Cuir an tiùb air raca tiùba gus dath a leasachadh airson 15 mionaidean. Chaidh susbaint an siùcair sho-sgaoilte a dhearbhadh le speactrofotometry ultraviolet-faicsinneach (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Sìona) aig tonn-fhaid de 620 nm.
Tomhasaich 0.5g de shampall ùr de Panax notoginseng, bleith e gu bhith na homogenate le 5ml uisge grùide, agus an uairsin cuir ann an centrifuge aig 10,000g airson 10 mionaidean. Chaidh an t-supernatant a lagachadh gu meud stèidhichte. Chaidh an dòigh Coomassie Brilliant Blue a chleachdadh. Chaidh susbaint pròtain soluble a thomhas a’ cleachdadh speactrophotometry ultraviolet-visible (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Sìona) aig tonn-fhaid de 595 nm agus chaidh obrachadh a-mach stèidhichte air lùb àbhaisteach albumin serum bovine.
Tomhasaich 0.5g de shampall ùr, cuir 5ml de dh’aigéad aiseatach 10% ris, bleith gu homogenate, sìolaich agus caolaich gu meud seasmhach. Chaidh an dòigh leasachaidh dath a chleachdadh le fuasgladh ninhydrin. Chaidh susbaint amino-aigéid shaor a dhearbhadh le speactrofotometry UV-faicsinneach (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Sìona) aig 570 nm agus chaidh a thomhas stèidhichte air lùb àbhaisteach leucine28.
Tomhasaich 0.5g de shampall ùr, cuir 5ml de fhuasgladh 3% de dh’aigéad sulfosalicylic ris, teas ann an amar-uisge agus crathadh airson 10 mionaidean. Às dèidh fuarachadh, chaidh am fuasgladh a shìoladh agus a thoirt gu meud seasmhach. Chaidh an dòigh dath-mheudrach le searbhag ninhydrin a chleachdadh. Chaidh susbaint proline a dhearbhadh le speactrofotometry ultraviolet-faicsinneach (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Sìona) aig tonn-fhaid de 520 nm agus chaidh a thomhas stèidhichte air lùb àbhaisteach proline29.
Chaidh susbaint saponin a dhearbhadh le cromagrafaidheachd leaghaidh àrd-choileanaidh a’ toirt iomradh air Pharmacopoeia Poblachd Sluagh na Sìona (deasachadh 2015). Is e prionnsapal bunaiteach cromagrafaidheachd leaghaidh àrd-choileanaidh leaghan àrd-bhruthadh a chleachdadh mar an ìre gluasadach agus teicneòlas dealachaidh mìrean ultrafine de chromagrafaidheachd colbh àrd-choileanaidh a chur an sàs anns an ìre statach. Tha an dòigh-obrach obrachaidh mar a leanas:
Suidheachaidhean HPLC agus Deuchainn Freagarrachd Siostaim (Clàr 1): Cleachd gel silica ceangailte ri octadecylsilane mar an lìonadh, acetonitrile mar an ìre gluasadach A agus uisge mar an ìre gluasadach B. Dèan elution caisead mar a chithear sa chlàr gu h-ìosal. Tha tonn-fhaid an lorg 203 nm. A rèir bàrr R1 nan saponins iomlan de Panax notoginseng, bu chòir gum biodh co-dhiù 4000 de phlàtaichean teòiridheach ann.
Ullachadh fuasglaidh àbhaisteach: Tomhais gu ceart ginsenoside Rg1, ginsenoside Rb1 agus notoginsenoside R1 agus cuir methanol ris gus measgachadh ullachadh anns a bheil 0.4 mg ginsenoside Rg1, 0.4 mg ginsenoside Rb1 agus 0.1 mg notoginsenoside R1 gach 1 ml de fhuasgladh.
Ullachadh fuasgladh deuchainn: Tomhas 0.6g de phùdar ginseng Panax agus cuir 50ml de methanol ris. Chaidh am fuasgladh measgaichte a thomhas (W1) agus fhàgail thar oidhche. An uairsin chaidh am fuasgladh measgaichte a ghoil gu socair ann an amar-uisge aig 80°C airson 2 uair a thìde. Às deidh fuarachadh, tomhas am fuasgladh measgaichte agus cuir am methanol ullaichte ris a’ chiad mhais W1. An uairsin crathadh gu math agus sìolaich. Tha an filtrate air fhàgail airson mion-sgrùdadh.
Cruinnich 10 μL den fhuasgladh àbhaisteach agus 10 μL den fhliutair gu ceart agus cuir a-steach iad ann an cromatagraf leaghaidh àrd-choileanaidh (Thermo HPLC-ultimate 3000, Seymour Fisher Technology Co., Ltd.) gus susbaint an t-saponin 24 a dhearbhadh.
Lùb àbhaisteach: tomhas fuasgladh àbhaisteach measgaichte de Rg1, Rb1 agus R1. Tha na suidheachaidhean cròmatagrafaidh mar an ceudna ris na tha gu h-àrd. Obraich a-mach an lùb àbhaisteach le bhith a’ plotadh farsaingeachd na stùice tomhaiste air an axis-y agus dùmhlachd saponin anns an fhuasgladh àbhaisteach air an axis-x. Faodar dùmhlachd an t-saponin obrachadh a-mach le bhith a’ cur farsaingeachd stùice tomhaiste an t-sampall a-steach don lùb àbhaisteach.
Tomhasaich 0.1 g de shampall P. notogensings agus cuir 50 ml de fhuasgladh 70% CH3OH ris. Rinneadh às-tharraing ultrasonach airson 2 uair a thìde, agus an uairsin cuir ann an ceud-chuairteachadh aig 4000 rpm airson 10 mionaidean. Gabh 1 ml de shupernatant agus caolaich e 12 uair. Chaidh susbaint flavonoid a dhearbhadh a’ cleachdadh speactrofotometry ultraviolet-faicsinneach (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., Sìona) aig tonn-fhaid de 249 nm. Tha quercetin mar aon de na stuthan cumanta àbhaisteach8.
Chaidh an dàta a chur air dòigh le bhith a’ cleachdadh bathar-bog Excel 2010. Chaidh bathar-bog staitistigeil SPSS 20 a chleachdadh gus mion-sgrùdadh caochlaideachd a dhèanamh air an dàta. Chaidh dealbhan a tharraing le bhith a’ cleachdadh Origin Pro 9.1. Tha na luachan staitistigeil obraichte a’ toirt a-steach a’ chuibheasachd ± SD. Tha aithrisean cudromachd staitistigeil stèidhichte air P < 0.05.
Aig an aon dùmhlachd de dh’aigéad oxalic air a spìonadh air na duilleagan, mheudaich susbaint Ca ann am freumhaichean Panax notoginseng gu mòr mar a mheudaich an ìre aoil a chaidh a chur ris (Clàr 2). An coimeas ri dìth aoil, mheudaich susbaint Ca 212% nuair a chaidh 3750 kg/h/m2 de aoil a chur ris gun searbhag oxalic a spìonadh. Airson an aon ìre de aoil a chaidh a chur ris, mheudaich susbaint Ca beagan mar a mheudaich dùmhlachd an t-searbhag oxalic a chaidh a spìonadh.
Tha susbaint Cd anns na freumhaichean eadar 0.22 agus 0.70 mg kg-1. Aig an aon dùmhlachd spraeraidh de dh’aigéad oxalic, mar a bhios an ìre aoil a thèid a chur ris ag àrdachadh, bidh susbaint Cd de 2250 kg/h a’ lùghdachadh gu mòr. An coimeas ris a’ bhuidheann smachd, lùghdaich susbaint Cd anns na freumhaichean 68.57% às deidh spraeadh le 2250 kg hm-2 aoil agus 0.1 mol l-1 de dh’aigéad oxalic. Nuair a chaidh aol gun aol agus 750 kg/h de aol a chur an sàs, lùghdaich susbaint Cd ann am freumhaichean Panax notoginseng gu mòr le dùmhlachd spraeraidh searbhag oxalic ag àrdachadh. Nuair a chaidh 2250 kg/m2 aoil agus 3750 kg/m2 aoil a chur an sàs, lùghdaich susbaint Cd nam freumhaichean an toiseach agus an uairsin dh’àrdaich e le dùmhlachd searbhag oxalic ag àrdachadh. A bharrachd air sin, sheall mion-sgrùdadh dà-atharrachail gu robh buaidh mhòr aig aol air susbaint Ca freumhaichean Panax notoginseng (F = 82.84**), gu robh buaidh mhòr aig aol air susbaint Cd ann am freumhaichean Panax notoginseng (F = 74.99**), agus searbhag oxalic. (F=7.72*).
Mar a mheudaich an ìre aoil a chaidh a chur ris agus dùmhlachd an searbhag oxalic a chaidh a spraeadh, lùghdaich susbaint MDA gu mòr. Cha robh eadar-dhealachadh mòr ann an susbaint MDA ann am freumhaichean Panax notoginseng às aonais aoil a chur ris agus le bhith a’ cur 3750 kg/m2 de aoil ris. Aig ìrean tagraidh de 750 kg/h/m2 agus 2250 kg/h/m2, lùghdaich susbaint aoil làimhseachadh spraeraidh searbhag oxalic 0.2 mol/L le 58.38% agus 40.21%, fa leth, an taca ri gun làimhseachadh spraeraidh searbhag oxalic. Chaidh an susbaint MDA as ìsle (7.57 nmol g-1) fhaicinn nuair a chaidh 750 kg hm-2 aoil agus 0.2 mol l-1 searbhag oxalic a spraeadh (Figear 1).
Buaidh spraeadh duilleach le searbhag oxalic air susbaint malondialdehyde ann am freumhaichean Panax notoginseng fo chuideam cadmium. Nota: Tha an uirsgeul san fhigear a’ sealltainn dùmhlachd searbhag oxalic aig an spraeadh (mol L-1), tha litrichean beaga eadar-dhealaichte a’ comharrachadh eadar-dhealachaidhean mòra eadar làimhseachadh den aon chur an sàs aoil. àireamh (P < 0.05). Mar an ceudna gu h-ìosal.
A bharrachd air cur 3750 kg/uair aoil air, cha robh eadar-dhealachadh mòr sam bith ann an gnìomhachd SOD ann am freumhaichean Panax notoginseng. Nuair a chaidh 0, 750 agus 2250 kg/uair/m2 de aol a chur ris, bha gnìomhachd SOD nuair a chaidh a làimhseachadh le bhith a’ frasadh le searbhag oxalic aig dùmhlachd de 0.2 mol/l gu math nas àirde na às aonais cleachdadh searbhag oxalic, ag àrdachadh 177.89%, 61.62% agus 45.08% fa leth. B’ e gnìomhachd SOD anns na freumhaichean (598.18 U g-1) an ìre as àirde às aonais cur aoil air agus nuair a chaidh a làimhseachadh le bhith a’ frasadh le searbhag oxalic aig dùmhlachd de 0.2 mol/l. Nuair a chaidh searbhag oxalic a spraeadh aig an aon dùmhlachd no 0.1 mol L-1, mheudaich gnìomhachd SOD le barrachd aoil a chaidh a chur ris. Às deidh frasadh le 0.2 mol/L searbhag oxalic, lùghdaich gnìomhachd SOD gu mòr (Figear 2).
Buaidh a bhith a’ frasadh dhuilleagan le searbhag oxalic air gnìomhachd superoxide dismutase, peroxidase agus catalase ann am freumhaichean Panax notoginseng fo chuideam cadmium
Coltach ri gnìomhachd SOD ann am freumhaichean, b’ e gnìomhachd POD ann am freumhaichean air an làimhseachadh às aonais aoil agus air an sprèadhadh le 0.2 mol L-1 searbhag oxalic an ìre as àirde (63.33 µmol g-1), a tha 148.35% nas àirde na smachd (25.50 µmol g-1). Le dùmhlachd sprèadhaidh searbhag oxalic ag àrdachadh agus làimhseachadh aoil 3750 kg/m2, mheudaich gnìomhachd POD an toiseach agus an uairsin lùghdaich i. An coimeas ris an làimhseachadh le 0.1 mol L-1 searbhag oxalic, lùghdaich gnìomhachd POD nuair a chaidh a làimhseachadh le 0.2 mol L-1 searbhag oxalic 36.31% (Figear 2).
A bharrachd air a bhith a’ frasadh 0.2 mol/l de dh’aigéad oxalic agus a’ cur 2250 kg/h/m2 no 3750 kg/h/m2 de dh’aol ris, bha gnìomhachd CAT gu math nas àirde na an smachd. Nuair a chaidh 0.1 mol/l de dh’aigéad oxalic a spraeadh agus 0.2250 kg/m2 no 3750 kg/h/m2 de dh’aol a chur ris, mheudaich gnìomhachd CAT 276.08%, 276.69% agus 33.05%, fa leth, an taca ri làimhseachadh às aonais frasadh searbhag oxalic. Bha gnìomhachd CAT anns na freumhaichean aig an ìre as àirde (803.52 μmol/g) anns an làimhseachadh gun aol agus anns an làimhseachadh searbhag oxalic 0.2 mol/L. B’ e gnìomhachd CAT an ìre as ìsle (172.88 μmol/g) nuair a chaidh a làimhseachadh le 3750 kg/h/m2 de dh’aol agus 0.2 mol/L de dh’aigéad oxalic (Figear 2).
Sheall mion-sgrùdadh dà-atharrachail gu robh gnìomhachd CAT agus gnìomhachd MDA freumhaichean Panax notoginseng ceangailte gu mòr ri meud an searbhag oxalic no an aoil a chaidh a spìonadh agus an dà làimhseachadh (Clàr 3). Bha gnìomhachd SOD anns na freumhaichean ceangailte gu mòr ri làimhseachadh aoil is searbhag oxalic no dùmhlachd spraeadh searbhag oxalic. Bha gnìomhachd POD freumha gu mòr an urra ri meud an aoil a chaidh a chur no an làimhseachadh aoil is searbhag oxalic.
Lùghdaich susbaint nan siùcairean so-sgaoilte anns na freumhaichean le barrachd aoil agus dùmhlachd spraeadh searbhag oxalic. Cha robh eadar-dhealachadh mòr ann an susbaint nan siùcairean so-sgaoilte ann am freumhaichean Panax notoginseng às aonais aoil agus nuair a chaidh 750 kg/h/m2 de aoil a chur ris. Nuair a chaidh 2250 kg/m2 de aoil a chur ris, bha susbaint an siùcair so-sgaoilte nuair a chaidh a làimhseachadh le 0.2 mol/L de dh’aigéad oxalic gu math nas àirde na bha e nuair a chaidh a làimhseachadh gun searbhag oxalic a spraeadh, ag àrdachadh 22.81%. Nuair a chaidh 3750 kg h/m2 de aoil a chur ris, lùghdaich susbaint an siùcair so-sgaoilte gu mòr mar a dh’àrdaich dùmhlachd an searbhag oxalic a chaidh a spraeadh. Lùghdaich susbaint an siùcair so-sgaoilte nuair a chaidh a làimhseachadh le 0.2 mol L-1 de dh’aigéad oxalic 38.77% an taca ris an fhear às aonais searbhag oxalic a spraeadh. A bharrachd air an sin, b’ e an làimhseachadh spraeadh searbhag oxalic 0.2 mol·L-1 an susbaint siùcair so-sgaoilte as ìsle, a bha 205.80 mg·g-1 (Figear 3).
Buaidh spraeadh duilleach le searbhag oxalic air susbaint siùcair iomlan soluble agus pròtain soluble ann am freumhaichean Panax notoginseng fo chuideam cadmium
Lùghdaich susbaint pròtain soluble ann am freumhaichean le barrachd aoil agus spraeadh searbhag oxalic. Às aonais aoil a chur ris, chaidh susbaint a’ phròtain soluble nuair a chaidh a làimhseachadh le spraeadh searbhag oxalic aig dùmhlachd de 0.2 mol L-1 a lùghdachadh gu mòr le 16.20% an taca ris a’ mheasgachadh smachd. Cha robh eadar-dhealachaidhean mòra sam bith ann an susbaint pròtain soluble freumhaichean Panax notoginseng nuair a chaidh 750 kg/h de aol a chur an sàs. Fo chumhachan cur an sàs de 2250 kg/h/m2 de aol, bha susbaint pròtain soluble làimhseachadh spraeadh searbhag oxalic 0.2 mol/L gu math nas àirde na bha e ann an làimhseachadh spraeadh neo-oxalic (35.11%). Nuair a chaidh 3750 kg·h/m2 de aol a chur an sàs, lùghdaich susbaint a’ phròtain soluble gu mòr mar a dh’àrdaich dùmhlachd spraeadh searbhag oxalic, leis an t-susbaint pròtain soluble as ìsle (269.84 μg·g-1) nuair a bha an spraeadh searbhag oxalic 0.2 mol·L-1. (Figear 3).
Cha robh eadar-dhealachaidhean mòra sam bith ann an susbaint nan amino-aigéid shaor ann am freumh Panax notoginseng nuair nach deach aol a chur air. Mar a bha dùmhlachd searbhag oxalic nuair a chaidh a spraeadh ag àrdachadh agus 750 kg/h/m2 de aol ga chur ris, lùghdaich susbaint nan amino-aigéid shaor an toiseach agus an uairsin dh’àrdaich e. ​​An coimeas ris an làimhseachadh às aonais searbhag oxalic a spraeadh, mheudaich susbaint nan amino-aigéid shaor gu mòr le 33.58% nuair a chaidh 2250 kg hm-2 de aol agus 0.2 mol l-1 de dh’aol a spraeadh. Lùghdaich susbaint nan amino-aigéid shaor gu mòr le dùmhlachd searbhag oxalic nuair a chaidh a spraeadh agus 3750 kg/m2 de aol ga chur ris. Chaidh susbaint amino-aigéid shaor làimhseachadh spraeadh searbhag oxalic 0.2 mol L-1 a lùghdachadh le 49.76% an coimeas ri làimhseachadh spraeadh gun searbhag oxalic. Bha an susbaint amino-aigéid shaor as àirde às aonais spraeadh searbhag oxalic agus b’ e 2.09 mg g-1 a bh’ ann. B’ e an làimhseachadh spraeraidh searbhag oxalic 0.2 mol/L a bha leis an ìre amino-aigéid shaor as ìsle (1.05 mg/g) (Figear 4).
Buaidh a bhith a’ frasadh dhuilleagan le searbhag oxalic air susbaint amino-aigéid shaor agus proline ann am freumhaichean Panax notoginseng fo chumhachan cuideam cadmium
Lùghdaich susbaint a’ phròiline anns na freumhaichean le àrdachadh ann an ìre an aoil a chaidh a chur ris agus meud an spraeadh le searbhag oxalic. Cha robh eadar-dhealachaidhean mòra sam bith ann an susbaint a’ phròiline ann am freumh Panax ginseng nuair nach deach aoil a chur ris. Mar a mheudaich dùmhlachd an spraeadh de dh’aigéad oxalic agus mar a mheudaich cleachdadh 750 no 2250 kg/m2 de aol, lùghdaich susbaint a’ phròiline an toiseach agus an uairsin mheudaich e. ​​Bha susbaint a’ phròiline ann an làimhseachadh spraeadh searbhag oxalic 0.2 mol L-1 gu math nas àirde na bha e ann an làimhseachadh spraeadh searbhag oxalic 0.1 mol L-1, ag àrdachadh 19.52% agus 44.33%, fa leth. Nuair a chaidh 3750 kg/m2 de aol a chur ris, lùghdaich susbaint a’ phròiline gu mòr mar a mheudaich dùmhlachd an searbhag oxalic a chaidh a spraeadh. Às deidh spraeadh 0.2 mol L-1 de dh’aigéad oxalic, lùghdaich susbaint a’ phròiline 54.68% an taca ris an sin às aonais spraeadh searbhag oxalic. B’ e 11.37 μg/g an ìre pròiline as ìsle nuair a chaidh a làimhseachadh le 0.2 mol/l searbhag oxalic (Figear 4).
Is e Rg1>Rb1>R1 an susbaint saponin iomlan ann am Panax notoginseng. Cha robh eadar-dhealachadh mòr ann an susbaint nan trì saponins le dùmhlachd a’ sìor fhàs de spraeadh searbhag oxalic agus dùmhlachd às aonais cleachdadh aoil (Clàr 4).
Bha susbaint R1 an dèidh spraeadh 0.2 mol L-1 de dh’aigéad oxalic gu math nas ìsle na às aonais spraeadh searbhag oxalic agus dòs aoil de 750 no 3750 kg/m2 a chur an sàs. Aig dùmhlachd searbhag oxalic spraeadh de 0 no 0.1 mol/L, cha robh eadar-dhealachadh mòr ann an susbaint R1 le barrachd is barrachd aoil air a chur ris. Aig dùmhlachd spraeadh de 0.2 mol/L de dh’aigéad oxalic, bha susbaint R1 ann an 3750 kg/h/m2 de aoil gu math nas ìsle na 43.84% às aonais aoil a chur ris (Clàr 4).
Mar a dh’àrdaich dùmhlachd searbhag oxalic anns an spraeadh agus 750 kg/m2 de aol air a chur ris, dh’àrdaich susbaint Rg1 an toiseach agus an uairsin lùghdaich e. ​​Aig ìrean cur aoil de 2250 agus 3750 kg/h, lùghdaich susbaint Rg1 le dùmhlachd searbhag oxalic a’ dol am meud anns an spraeadh. Aig an aon dùmhlachd de dh’aigéad oxalic air a spraeadh, mar a bhios meud an aoil ag àrdachadh, bidh susbaint Rg1 ag àrdachadh an toiseach agus an uairsin a’ lùghdachadh. An coimeas ris a’ bhuidheann smachd, ach a-mhàin susbaint Rg1 ann an trì dùmhlachdan de dh’aigéad oxalic agus làimhseachadh aoil 750 kg/m2, a bha nas àirde na an buidheann smachd, bha susbaint Rg1 ann am freumhaichean Panax notoginseng ann an làimhseachadh eile nas ìsle na an buidheann smachd. B’ e an susbaint as àirde de Rg1 nuair a chaidh 750 kg/h/m2 de aol a spraeadh agus 0.1 mol/l de dh’aigéad oxalic, a bha 11.54% nas àirde na an buidheann smachd (Clàr 4).
Mar a dh’èirich dùmhlachd searbhag oxalic anns an spraeadh agus an ìre aoil a chaidh a chur an sàs aig ìre sruthadh de 2250 kg/h, dh’èirich susbaint Rb1 an toiseach agus an uairsin thuit e. Às dèidh spraeadh 0.1 mol L-1 de dh’aigéad oxalic, ràinig susbaint Rb1 luach as àirde de 3.46%, a bha 74.75% nas àirde na às aonais spraeadh searbhag oxalic. Airson làimhseachadh aoil eile, cha robh eadar-dhealachaidhean mòra ann eadar diofar dùmhlachdan de spraeadh searbhag oxalic. Às dèidh spraeadh le 0.1 agus 0.2 mol L-1 de dh’aigéad oxalic, mar a dh’èirich an ìre aoil, thuit susbaint Rb1 an toiseach agus an uairsin thuit e (Clàr 4).
Aig an aon dùmhlachd spraeraidh le searbhag oxalic, mar a mheudaich an ìre aoil a chaidh a chur ris, mheudaich susbaint nam flavonoids an toiseach agus an uairsin lùghdaich e. ​​Cha deach eadar-dhealachadh mòr sam bith a lorg ann an susbaint nam flavonoids nuair a chaidh diofar dùmhlachdan de dh’aigéad oxalic a spraeadh às aonais aoil agus 3750 kg/m2 de aoil. Nuair a chaidh 750 agus 2250 kg/m2 de aoil a chur ris, mar a mheudaich dùmhlachd an t-searbhag oxalic a chaidh a spraeadh, mheudaich susbaint nam flavonoids an toiseach agus an uairsin lùghdaich e. ​​Nuair a chaidh 750 kg/m2 a chur an sàs agus searbhag oxalic ga spraeadh aig dùmhlachd de 0.1 mol/l, b’ e susbaint nam flavonoids an ìre as àirde – 4.38 mg/g, a tha 18.38% nas àirde na nuair a chaidh an aon ìre de aoil a chur ris, agus cha robh feum air searbhag oxalic a spraeadh. Mheudaich susbaint nam flavonoids nuair a chaidh a làimhseachadh le spraeadh searbhag oxalic 0.1 mol L-1 21.74% an taca ris an làimhseachadh às aonais searbhag oxalic agus an làimhseachadh le aol aig dòs de 2250 kg/m2 (Figear 5).
Buaidh frasadh dhuilleagan le oxalate air susbaint flavonoids ann am freumh Panax notoginseng fo chuideam cadmium
Sheall mion-sgrùdadh dà-atharrachail gu robh susbaint an siùcair sho-sgaoilte ann am freumhaichean Panax notoginseng gu mòr an urra ri meud an aoil a chaidh a chur ris agus dùmhlachd an searbhag oxalic a chaidh a spraeadh. Bha susbaint a’ phròtain sho-sgaoilte anns na freumhaichean co-cheangailte gu mòr ri dòs an aoil agus an searbhag oxalic. Bha susbaint nan amino-aigéid shaor agus proline anns na freumhaichean co-cheangailte gu mòr ri meud an aoil a chaidh a chur ris, dùmhlachd an searbhag oxalic a chaidh a spraeadh, aoil agus searbhag oxalic (Clàr 5).
Bha susbaint R1 ann am freumhaichean Panax notoginseng gu mòr an urra ri dùmhlachd searbhag oxalic a chaidh a spraeadh, meud an aoil, aoil agus searbhag oxalic a chaidh a chur ris. Bha susbaint flavonoids an urra gu mòr ri dùmhlachd searbhag oxalic a chaidh a spraeadh agus meud an aoil a chaidh a chur ris.
Chaidh mòran leasachaidhean a chleachdadh gus ìrean cadmium ann an lusan a lughdachadh le bhith a’ daingneachadh cadmium san ùir, leithid aol agus searbhag oxalic30. Tha aol air a chleachdadh gu farsaing mar leasaiche ùir gus ìrean cadmium ann am bàrr a lughdachadh31. Dh’innis Liang et al.32 gum faodar searbhag oxalic a chleachdadh cuideachd gus ùir air a thruailleadh le meatailtean troma a leigheas. Às deidh diofar dùmhlachdan de dh’aigéad oxalic a chur ri ùir air a thruailleadh, mheudaich susbaint stuth organach na h-ùire, lùghdaich comas iomlaid cation, agus mheudaich pH33. Faodaidh searbhag oxalic cuideachd freagairt le ianan meatailt san ùir. Fo chumhachan cuideam Cd, mheudaich susbaint Cd ann am Panax notoginseng gu mòr an taca ris a’ smachd. Ach, ma thèid aol a chleachdadh, tha e air a lughdachadh gu mòr. Nuair a chaidh 750 kg / h / m de aol a chuir an sàs san sgrùdadh seo, ràinig susbaint Cd freumhaichean an ìre nàiseanta (is e crìoch Cd Cd≤0.5 mg / kg, AQSIQ, GB / T 19086-200834), agus bha a’ bhuaidh math. . Gheibhear a’ bhuaidh as fheàrr le bhith a’ cur 2250 kg/m2 de aol ris. Bidh cur aoil ris a’ cruthachadh àireamh mhòr de làraichean farpais airson Ca2+ agus Cd2+ san ùir, agus bidh cur searbhag oxalic a’ lughdachadh susbaint Cd ann am freumhaichean Panax notoginseng. Às deidh measgachadh aoil agus searbhag oxalic, lùghdaich susbaint Cd freumh Panax ginseng gu mòr agus ràinig e an ìre nàiseanta. Tha Ca2+ san ùir air a ghlacadh gu uachdar nam freumhaichean tro phròiseas sruthadh mais agus faodar a ghabhail a-steach do cheallan freumhaichean tro shianalan calcium (sianalan Ca2+), pumpaichean calcium (Ca2+-AT-Pase) agus luchd-dìon Ca2+/H+, agus an uairsin air a ghiùlan gu còmhnard. chun na freumhaichean. Xylem23. Bha co-dhàimh àicheil cudromach eadar susbaint Ca agus Cd anns na freumhaichean (P < 0.05). Lùghdaich susbaint Cd le bhith a’ meudachadh susbaint Ca, a tha a rèir a’ bheachd air nàimhdeas eadar Ca agus Cd. Sheall ANOVA gu robh buaidh mhòr aig meud an aoil air susbaint Ca ann am freumh Panax notoginseng. Dh’innis Pongrack et al. 35 gu bheil Cd a’ ceangal ri oxalate ann an criostalan calcium oxalate agus a’ farpais ri Ca. Ach, cha robh buaidh riaghlaidh searbhag oxalic air Ca cudromach. Tha seo a’ sealltainn nach e sileadh sìmplidh a th’ ann an sileadh calcium oxalate bho searbhag oxalic agus Ca2+, agus gum faodadh grunn shlighean metabolach smachd a chumail air a’ phròiseas co-shìolaidh.
Fo chuideam cadmium, bidh meud mòr de ghnèithean ocsaidean ath-ghnìomhach (ROS) air an cruthachadh ann an lusan, a’ dèanamh cron air structar membran cealla36. Faodar susbaint Malondialdehyde (MDA) a chleachdadh mar chomharradh gus ìre ROS agus ìre a’ mhillidh air membran plasma lusan37 a mheasadh. Tha an siostam antioxidant na dhòigh dìon cudromach airson gnèithean ocsaidean ath-ghnìomhach a ghlacadh38. Mar as trice bidh gnìomhachd einnseanan antioxidant (a’ gabhail a-steach POD, SOD, agus CAT) air an atharrachadh le cuideam cadmium. Sheall na toraidhean gu robh susbaint MDA co-cheangailte gu dearbhach ri dùmhlachd Cd, a’ nochdadh gun robh ìre peroxidation lipid membran planntrais a’ dol nas doimhne le dùmhlachd Cd a’ sìor fhàs37. Tha seo a rèir toraidhean an sgrùdaidh le Ouyang et al.39. Tha an sgrùdadh seo a’ sealltainn gu bheil buaidh mhòr aig aol, searbhag oxalic, aol agus searbhag oxalic air susbaint MDA. Às dèidh nebulization de 0.1 mol L-1 searbhag oxalic, lùghdaich susbaint MDA Panax notoginseng, a’ nochdadh gum faodadh searbhag oxalic bith-ruigsinneachd ìrean Cd agus ROS ann am Panax notoginseng a lughdachadh. Is ann anns an t-siostam einnsein antioxidant a bhios gnìomh dì-phuinnseanachaidh a’ phlannt a’ gabhail àite. Bidh SOD a’ toirt air falbh O2- a tha ann an ceallan planntrais agus a’ dèanamh O2 neo-phuinnseanta agus H2O2 ìosal-phuinnseanta. Bidh POD agus CAT a’ toirt air falbh H2O2 bho fhigheagan planntrais agus a’ catalachadh lobhadh H2O2 gu H2O. Stèidhichte air mion-sgrùdadh proteome iTRAQ, chaidh a lorg gun deach ìrean abairt pròtain SOD agus PAL a lùghdachadh agus gun deach ìre abairt POD a mheudachadh às dèidh cur aoil fo chuideam Cd40. Bha buaidh mhòr aig dòs searbhag oxalic agus aoil air gnìomhachd CAT, SOD agus POD ann am freumh Panax notoginseng. Mheudaich làimhseachadh spraeraidh le 0.1 mol L-1 searbhag oxalic gnìomhachd SOD agus CAT gu mòr, ach cha robh a’ bhuaidh riaghlaidh air gnìomhachd POD follaiseach. Tha seo a’ sealltainn gu bheil searbhag oxalic a’ luathachadh lobhadh ROS fo chuideam Cd agus gu ìre mhòr a’ crìochnachadh toirt air falbh H2O2 le bhith a’ riaghladh gnìomhachd CAT, a tha coltach ri toraidhean rannsachaidh Guo et al.41 air na h-einsìmean antioxidant aig Pseudospermum sibiricum. Kos. ). Tha buaidh cur 750 kg/h/m2 de aol air gnìomhachd einnseanan an t-siostaim antioxidant agus susbaint malondialdehyde coltach ri buaidh spraeadh le searbhag oxalic. Sheall na toraidhean gum b’ urrainn làimhseachadh spraeadh searbhag oxalic gnìomhachd SOD agus CAT ann am Panax notoginseng a neartachadh nas èifeachdaiche agus strì an aghaidh cuideam Panax notoginseng a mheudachadh. Chaidh gnìomhachd SOD agus POD a lùghdachadh le làimhseachadh le 0.2 mol L-1 searbhag oxalic agus 3750 kg hm-2 aol, a’ nochdadh gum faodadh cus spraeadh de dh’ àrd-chruinneachaidhean de dh’ searbhag oxalic agus Ca2+ cuideam planntrais adhbhrachadh, a tha a rèir sgrùdadh Luo agus msaa. al. Wait 42.